혈구계산기은 (Hemocytometer) 셀 계산 절차

혈구계산기은 (Hemocytometer) 의학적 목적으로 혈액 세포를 정확하게 세도록 설계된 19세기 초부터 존재해 왔다. 이 기술은 생물학적 샘플에서 세포 성분을 정량화하기 위한 표준화되고 신뢰할 수 있는 방법을 제공함으로써 혈액학 분야에 혁명을 일으켰다. 혈구계산기은 물리학, 화학, 생물학의 원리를 결합하여 다양한 과학 분야의 혁신적인 개념을 제공한다. 표면장력을 활용해 셀을 혈구계산기의 계수영역에 고르게 분포시켜 대표적인 샘플링을 보장한다. 이 장치는 일반적으로 유리 표면에 식각된 격자 패턴을 통합하여 세포 농도와 밀도를 정밀하게 측정할 수 있습니다. 이를 통해 연구자들과 임상의들은 적혈구와 백혈구의 수, 혈소판 수치, 세포 형태와 같은 다양한 매개변수를 분석하여 개인의 건강을 평가할 수 있다. 또한 hemocytometry 을 통해 얻은 결과의 통계적 중요성은 정확한 결론을 도출하는 데 중요한 역할을 한다. 혈구계산기의 사용은 혈액 분석을 넘어 미생물학, 수의학, 산업 연구 등 다양한 분야에서 응용되고 있다. 이는 과학적 조사 및 의료 진단의 기본 도구로서의 hemocytometry 의 다용성과 지속적인 관련성을 강조한다.

셀 계산 및 셀 밀도 측정에 필수적인 도구인 혈구계산기은 9개의 1 x 1 mm (1 mm2) 섹터를 구분하는 선을 신중하게 식각하는 것 이상을 제공합니다. 더 큰 정확도를 제공하기 위해 각 섹터는 사용 중인 혈구계산기 의 특정 버전에 따라 동일한 크기의 16개 또는 25개의 작은 정사각형으로 더 분할됩니다. 이러한 작은 정사각형은 분석을 위한 셀의 일관된 분포를 보장하는 그리드 패턴을 만들어 정밀한 계산을 용이하게 합니다.

계수 과정 중에 특수 설계된 슬라이드가 챔버의 상단에 배치되어 챔버의 표면과 슬라이드의 하단 사이에 0.1mm의 좁은 간격을 둡니다. 이 의도적인 간격은 분석을 위한 알려진 볼륨을 설정하는 중요한 목적을 수행한다. 챔버의 치수와 갭을 고려하여 0.1 mm3(1E-4 mL에 상당)의 정확한 부피를 얻는다.

세포들이 챔버 안으로 유입되면, 그들은 자연스럽게 그 틈 안에서 이용 가능한 공간을 차지한다. 결과적으로, 각 1mm2 섹터 내의 가시적인 셀은 1E-4 mL 부피에 존재하는 셀 모집단을 대표한다. 이 독창적인 디자인은 연구자들과 과학자들이 밀리리터 당 세포의(cells per milliliter (cells/mL)) 수량화 가능한 측정을 제공하면서 작은 규모로 세포 밀도를 추정할 수 있게 한다.

4x1mm2 섹터의 셀 수를 계산하면 다음과 같은 셀 수가 31,25,40,33으로 평균적으로 1mm2당 32.25개가 됩니다. 이 영역은 1E-4 mL 부피에 해당하므로 1E-4 mL에는 32.25 개의 셀이 존재하여 322,500 개의 셀/mL의 밀도가 발생합니다. 공식은 포함되지 않았습니다. – 우리는 단지 혈구계산기 차원을 기반으로 셀 밀도가 무엇인지 추론했습니다. 이것을 일반적인 경우로 확장하면, 공식은 셀 밀도 = (총 셀 카운트 / 제곱 카운트) / 단일 정사각형의 부피가 될 것이다. 이는 수행된 희석을 설명하지 않는다.

1mm2 정사각형의 경우, 단일 정사각형의 부피는 1E-4였지만 셀을 세기 위해 선택한 정사각형 크기에 따라 다를 수 있습니다. 예를 들어, 중앙 사각형 안의 작은 사각형은 적혈구 계산에 사용됩니다. 이 경우 정사각형 부피는 1E-4 mL / 25 (1mm2 중앙 정사각형에 25개의 작은 정사각형이 있음)로 4E-6 mL의 작은 정사각형 부피로 이어진다.

혈구계산기 수에서 얻을 수 있는 또 다른 유용한 측정 기준이 있습니다. 바로 생존 가능성 (viability)입니다. 생존 가능성은 배양의 모든 세포 중 살아있는 세포의 양을 측정한다. 죽은 세포는 염색하지만 살아있는 세포는 염색하지 않는 계수 용액에 염료를 첨가하여 측정할 수 있다.

세포 밀도는 건강한 배양을 유지하고, 하위 배양, 세포 은행을 만들고, 유동 세포 측정과 ELISA를 위한 샘플을 준비하고, 출판을 위해 단순히 당신의 숫자를 추적하기 위해 중요하다. 다른 한편으로 생존력은 본질적으로 배양 건강의 지표이다; 세포독성 물질이 주어진 특정 시간 내에 얼마나 많은 세포가 죽는지를 이해하는 독성 테스트에서도 유용하다.

혈구계산기   대학은 다른 분야로도 확장되었다. 발효 중 효모의 밀도와 품질을 평가하기 위해 양조에, 최종 제품의 꽃가루 밀도를 결정할 때 꿀 생산에 일상적으로 사용된다. 기술은 또한 혈액 세포계를 진화시켜 일회용 챔버로 자동 세포 계수를 가능하게 하여 거의 즉각적인 결과를 제공한다. 이 새로운 접근 방식은 광범위한 공통 세포 라인에서 상당히 잘 작동하지만(그리고 엄청난 시간을 절약합니다!) 희귀 질환이 있는 환자 세포와 같은 더 많은 맞춤형 애플리케이션을 위해 미세 조정이 필요할 수 있습니다.

혈구계산기를 사용한 셀 카운트는 매우 반복적이고 시간이 많이 소요될 수 있습니다. 특히 하루에 10-20개의 샘플을 검사해야 할 때, 생존 가능한 세포를 세고 모든 세포에 대한 계산을 즉시 수행하십시오.

HemocyTap은 셀을 집계하고 일일 계산을 자동으로 수행하는 데 사용되는 앱입니다. 살아있는 세포와 죽은 세포를 세고, 세포 밀도, 생존 가능성, 새로운 배양량을 계산하고, 이메일을 통해 데이터를 저장하고 전송하고, 시간 경과에 따른 진화를 계획할 수 있습니다. 이 앱의 주요 기능은 다음과 같습니다:

1.두 개의 계수기를 사용하세요: 하나는 살아있는 세포를 위한 것이고 다른 하나는 죽은 세포를 위한 것입니다.

2. 각각 다른 소리를 내며 어떤 버튼을 눌렀어야 했는지 알려줍니다.

3. 칸마다 셀 수를 세어 본 모든 셀을 기록합니다.

4. 현미경으로 볼 수 있는 사각형을 변경하는 것과 동일한 방식으로 세고 있는 사각형을 변경합니다.

5. 카운트할 기본 제곱을 선택하면 강조 표시됩니다.

6. 중앙 사각형 내부의 큰 사각형 또는 작은 사각형을 셀지 결정할 수 있습니다.

7. 카운트의 평균을 계산합니다.

8. 하위 배양 시 필요한 세포 밀도를 얻기 위해 추가할 볼륨을 알려줍니다

9. 세포 생존 가능성과 살아있는 세포 번호를 보여줍니다.                              

셀 카운트에 대한 자세한 내용이나 hemocyTap 앱을 다운로드하려면 www.hemocytometer.org 을 방문하십시오